四、焦磷酸解作用
DNApolⅠ的这种活性可以催化3'末端焦磷酸解DNA分子。这种作用就是无机焦磷酸分解DNA生长链,可以认为是DNA聚合作用的逆反应,而且这种水解DNA链作用需要有模板DNA的存在。(dNMP)n+XPPi←(dNMP)n-x+X(dNPPP)→DNA。
五、焦磷酸交换作用
催化dNTP末端的PPi同无机焦磷酸的交换反应。反应式为32P32Pi+dNPPP←dNP32P32P+PPi→DNA。
dna聚合酶共性
[1]以脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)为前体催化合成DNA。
[2]需要模板和引物的存在。
[3]不能起始合成新的DNA链。
[4]催化dNTP加到生长中的DNA链的3'-OH末端。
[5]催化DNA合成的方向是5'→3'。
(1)依赖DNA的DNA聚合酶。
(2)依赖RNA的DNA聚合酶。
(3)依赖DNA的RNA聚合酶。
(4)依赖RNA的RNA聚合酶。
前两者是DNA聚合酶,它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ,PolⅡ和PolⅢ等)。DNA聚合酶只能在有引物的基础上,即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸,这DNA的合成方向记为5′→3′。
换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外,还需要Mg2+、模板DNA和引物,迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。
同样,上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中主要的RNA合成酶,它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物,并需有DNA模板以及Mn2及Mg2的存在下,在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′,5′-磷酸二酯键,其新生链的方向也是5′→3′。
RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105,由5条多肽链组成,分别命名为α,α,β,β′,和γ,全酶可用α2ββ′λ表示。
真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12个大小不等亚基组成。
聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外,在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。
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